پایان نامه بررسی اثرات سمیت نانو لوله کربنی تک دیواره بر سلول های سرطانی پستان در شرایط برون تن

فهرست:

چکیده. 1

مقدمه. 2

فصل اول: کلیات

1-1-سرطان پستان. 4

1-2- اپیدمیولوژی. 5

1-3- عوامل علت شناختی. 5

1-3-1- اضافه وزن. 6

1-3-2- نداشتن فعالیت جسمی. 7

1-3-3- الکل. 7

1-3-4- رژیم غذایی. 8

1- 3-5- سیگار 9

1-3-6- هورمون­های استروئیدی و گیرندههایشان. 9

1-3-6-1- هورمون­های استروئیدی. 9

1-3-6-2- گیرندههای هورمون­های استروئیدی. 10

1-3-6-3-  تاریخچه حاملگی و شیردهی. 11

1-3-6-4-  استروژن. 12

1-3-6-5-  هورمون جایگزین درمانی. 12

1-3-7-  مصرف داروی خوراکی ضد بارداری. 13

1-3-8-  کار در شب و عوامل محیطی. 14

1-3-9- سن. 14

1-3-10- جنسیت.. 15

1-3-11- تاریخچه فعال بودن جنسی. 15

1-3-12-  تاریخچه خانوادگی. 16

1-3-13- تاریخچه شخصی. 16

1-3-14- تغییرات سلولی پستان، زخم و جراحت پستان. 17

1-3-15- مصرف دی اتیل ستیل بسترول. 17

1-3-16- سابقه بیماری خوش خیم پستان. 17

1-3-17- ژنهای پر خطر 18

1-3-18- سندرم های پرخطر 19

1-3-19- نقش آنتی ژن HER2/neu. 20

1-3-20- تراکم ماموگرافی. 20

1-4- فرضیه های چگونگی تشکیل و منشا تومورها 20

1-5- ناهمگنی ‌سرطان پستان. 21

1-6- انواع سرطان پستان. 22

1-6-1- سرطان پستان لومینال A و  B. 22

1-6-2-  سرطان پستان HER2+: 22

1-6-3-  شبه بازال. 22

1-7- مرحله بندی سرطان. 22

1-7-1- مرحله صفر 23

1-7-2- مرحله اول. 23

1-7-3- مرحله دوم. 23

1-7-4- مرحله سوم. 24

1-7-5- مرحله چهارم. 24

1-8- نانو در درمان و پیشگیری سرطان. 24

1-9- نانولوله های کربنی. 26

1-9-1- خصوصیات نانولوله های کربنی. 26

1-9-2-کاربرد به عنوان حامل دارویی. 28

1-9-3- پراکنده کردن نانولوله کربنی در حلال. 28

1-9-4- عاملدار کردن نانولوله کربنی. 29

1-9-4-1- روش کووالان. 29

1-9-4-2- روش غیرکووالان. 30

1-9-4-3- پگیلاسیون برای بهبود ویژگیها در کاربردهای زیستی. 31

فصل دوم: مروری بر متون گذشته

2-1- تجویز، جذب و انتقال CNT. 33

2-2- تجویز وریدی. 34

2-3- کاربرد نانوکربن تیوب تک دیواره و ایمنی زیستی. 35

2-3-1- ایمنی زیستی نانولوله تک دیواره به عنوان حامل دارویی. 36

2-4-  کاربرد در درمان هدفمند. 37

2-5- کاربرد در ژن رسانی. 38

2-6- کاربرد در سیستمهای دارورسانی هدفمند برای درمان سرطان. 38

فصل سوم: مواد و روش­ها

3-1- مواد و روش‌ها 42

3-1-1- مواد 42

3-1-2-ویژگیهای نانوذرات کربنی. 43

3-2- روش ها 45

3-2-1- کشت و تیمار سلولی. 45

3-2-1-1- رده های سلولی مورد استفاده 45

مشخصات کلی سلول. 46

نام رده سلولی. 46

3-2-1-2- دفریز کردن سلول‌های منجمد. 47

3-2-1-3- فریز کردن سلول‌ها 47

3-2-1-4- محلول ها و بافرهای مورد نیاز 48

3-2-1-4-1- بافر فسفات نمکی(PBS) 48

3-2-1-4-2-  محیط کشت کامل. 48

3-2-1-5-تست گذاری سلول ها 49

3-2-1-5-1- شمارش سلول ها 49

3-2-1-5-3-بررسی زنده بودن سلول‌ها با استفاده از روشMTT. 50

3-2-1-5-4- تعیین IC-50. 51

3-2-1-5-5- سنجش میزان رهاسازی آنزیم لاکتات دهیدروژناز به محیط کشت.. 52

3-2-1-5-6- رنگ آمیزی با 33258Hoechst 52

فصل چهارم: نتایج

4-1- سمیت القا شده توسط نانولوله تک دیواره با گروه عاملی حلقوی بر روی سلول‌های HUV-EC-C, MCF-7 وPC12  54

4-2- بررسی تاثیر نانولوله تک دیواره با گروه عاملی حلقوی بر سرنوشت سلول MCF-7 به وسیله سنجش MTT  55

4-3- بررسی تاثیر نانولوله تک دیواره با گروه عاملی حلقوی بر سرنوشت سلول MCF-7 به وسیله سنجش LDH   59

4-4- بررسی تاثیر نانولوله تک دیواره با گروه عاملی حلقوی بر سرنوشت سلول  HUVECبه وسیله سنجش MTT  62

4-5- بررسی تاثیر نانولوله تک دیواره با گروه عاملی حلقوی بر سرنوشت سلولHUVEC  به وسیله سنجش LDH   65

4-6- بررسی تاثیر نانولوله تک دیواره با گروه عاملی حلقوی بر سلول PC12به وسیله سنجش MTT. 69

4-6- بررسی تاثیر نانولوله تک دیواره با گروه عاملی حلقوی بر سلول  PC12به وسیله سنجش LDH.. 71

4-7- سمیت القا شده توسط نانولوله تک دیواره کربوکسیله بر روی سلول‌های HUV-EC-C, MCF-7وPC12. 75

4-8- بررسی تاثیر نانولوله تک دیواره کربوکسیله بر سرنوشت سلول MCF-7 به وسیله سنجش MTT. 76

4-9- بررسی تاثیر نانولوله تک دیواره کربوکسیله بر سرنوشت سلول MCF-7 به وسیله سنجش LDH.. 77

4-100- بررسی تاثیر نانولوله تک دیواره کربوکسیله بر سرنوشت سلول  HUVECبه وسیله سنجش MTT. 78

4-11- بررسی تاثیر نانولوله تک دیواره کربوکسیله بر سرنوشت سلول  HUVECبه وسیله سنجش LDH.. 79

4-12- بررسی تاثیر نانولوله تک دیواره کربوکسیله بر سرنوشت سلول  PC12به وسیله سنجش MTT. 80

4-13- بررسی تاثیر نانولوله تک دیواره کربوکسیله بر سرنوشت سلول  PC12به وسیله سنجش LDH.. 81

4-14-  القا مرگ آپوپتوزی. 82

فصل پنجم: بحث و پیشنهادات

5-1-بحث.. 85

5-2-پیشنهاد 94

منابع. 95                      

خلاصه انگلیسی.. 102

ضمائم.. 103

منبع:

1. Abdellatif, KH., Abdelall, E., Abdelgawad, M., Ahmed, M.,Bakr, R., 2014,  Synthesis and anticancer activity of some new pyrazolo[3,4-d]pyrimidin-4-one derivatives, Molecules, Vol. 19, P.3297-3309.

2. . Aguas, F., Martins, A., Gomes, T., De Sousa, M., Silva, D., 2006,  Portuguese enopause

Society and Portuguese Gynaecology Society ,2005, Prophylaxis approach to a symptomatic post-menopausal women  breast cancer,  Maturitas,Vol. 52,p. S23-31.

3. Aiello, EJ., Buist, DS., White, E., Porter, PL.,2005, Association between

mammographic breast density and breast cancer tumor characteristic,  Cancer

Epidemiol Biomarkers Prev,Vol. 14,p. 662-668.

4. Ali S, Coombes RC ,2002, Endocrine-responsive breast cancer and strategies

for combating resistance, Nat Rev Cancer,Vol. 2,p.101-112.

5. Antoniou, A., Pharoah, PD., Narod, S., 2003, Average risks of breast and ovarian cancer

associated with BRCA1 or BRCA2 mutations detected in case Series unselected for family

history: a combined analysis of 22 studie, Am J Hum Genet ,Vol.72, P.1117-30.

6.Borresen-Dale, AL., 2003, TP53 and breast cancer, Hum Mutat, Vol.21, P.292-300

7. CHEK2*1100delC and susceptibility to breast cancer: a collaborative analysis involving10,860 breast cancer cases and 9,065 controls from 10 studies, 2004,  Am J Hum Genet, Vol.74, P.1175-82.

8. Cheng, J.,[etal].,2008, Reversible accumulation of PEGylated single-walled carbon nanotubes inthe mammalian nucleus, ACS Nano,Vol. 2, P.2085-2094.

9 .Cole, MP., Jones, CT., Todd, ID.,1971, A new anti-oestrogenic agent in late breast

cancer. An early clinical appraisal of ICI46474, Br J Cancer,Vol. 25,p. 270-275.

10. Dumitrescu RG., Cotarla I. , 2005 , Understanding breast cancer risk where do

we stand in 2005? , J Cell Mol Med, Vol 9, P. 208-221.

11. Easton, DF.,[ et al]., 2007, Genome-wide association study identifies novel breast cancer susceptibility loci, Nature, Vol.447, P.1087-93.

12. Foldvari, M., Bagonluri, M., 2008, Carbon nanotubes as functional excipients for

nanomedicines: I. Pharmaceutical properties,  Nanomedicine , Vol.3, P.173-182.

13. Foldvari, M., Bagonluri, M., 2008, Carbon nanotubes as functional excipients for

nanomedicines: II. Drug delivery and biocompatibility issues,Nanomedicine ,Vol. 3,P.183-200.

14. Georgakilas, V., Tzitzios, V., Gournis, D., Petridis, D., 2005, Attachment of magnetic

nanoparticles on carbon nanotubes and their soluble derivatives, Chem Mater , Vol. 17, P.1613-1617.

15. Ghorab, M., Ragab, F.,Alqasoumi, S.,Alafeefy, A.,Aboulmagd, S.,2014, Synthesis of some new pyrazolo[3,4-d]pyrimidine derivatives of expected anticancer and radioprotective activity, Molecules, Vol.19, P. 3297-3309.

16. Gu, Y., Cheng, J., Jin, J., Cheng, S., Wong,W.,2011,  Development and evaluation of pH-responsive single-walled carbon nanotube-doxorubicin,  International Journal of Nanomedicine, Vol. 16, P.2889–2898.

17. Hearle, N., Schumacher, V., Menko FH., 2006, Frequency and spectrum of cancers in the Peutz-Jeghers syndrome, Clin Cancer Res, Vol.12, P.3209-15.

18. Henderson, BE., Bernstein, L., 1991, The international variation in breast cancer rates: anepidemiological assessment, Breast Cancer Res Treat,Vol.18 Suppl 1:S11-7.

19. Hung, MC., Lau, YK. ,1999, Basic science of HER-2/neu: a review, Semin Oncol,Vol.

26,P. 51-59.

20. Huang, P., Zhang, C., Xu, C., Bao, L., Li, Z.,2010, Preparation and characterization of

near-infrared region absorption enhancer carbon nanotubes hybridmaterials, Nano Biomed Eng, Vol. 2,4, P.225-230.

21.  Jain, N.K. ,  Singh, R.,  Mehra, N.K.,  Jain, V., 2013,  Gemcitabine-loaded smart carbon nanotubes for effective targeting to cancer cells, Informa Healthcare, Vol. 21, No. 6 , P. 581-592.

22. Ji, S.,[etal].,2010, Carbon nanotubes in cancer diagnosis and therapy. Biochimica et Biophysica Acta, Vol.1806, P.29-35.

23. Jia, N., Lian, Q., Shen, H., Wang, C., Li, X., Yang, Z.,2007, Intracellular delivery of

quantum dots tagged antisense oligodeoxynucleotides by functionalized multiwalled carbon nanotubes, Nano Lett, Vol.10, P.2976-2980.

24. Kakarala, M., Wicha, M., 2008, Implications of the cancer stem-cell hypothesis

for breast cancer prevention and therapy, J Clin Oncol , Vol.26, P. 2813-2820.

25. Kennecke, H., Yerushalmi, R., Woods, R., 2010, Metastatic behavior of breast cancer subtypes,  J Clin Oncol, Vol. 28,20, P.3271–3277.

26. Khuder, S., Mutgi, A., Nugent, S.,2001, Smoking and breast cancer: a meta-analysis, Rev Environ Health ,Vol.16, p.253-61.

27. Kim, D., [etal]., 2003,  Synthesis­ and biological evaluations of pyrazolo[3,4-d]pyrimidines as cyclin-dependent kinase 2 inhibitor,Eur. J. Med. Chem, Vol.38, P. 525–532.

28. Kroenke, CH., Hankinson, SE., Schernhammer, ES., Colditz, GA., Kawachi, I., Holmes, ,MD., 2004,Caregiving stress, endogenous sex steroid hormone levels, and breast cancer incidence, AmJ Epidemiol,Vol.159,P.1019-27.

29. Lacroix, M., Leclercq, G., 2005,  The portrait of hereditary breast cancer, Breast Cancer Research and Treatment,Vol. 89 ,3,P. 297-304.

30. Lerner, LJ., Jordan, VC.,1990, Development of antiestrogens and their use in

breast cancer: eighth Cain memorial award lecture, Cancer ResVol. 50,p. 4177-4189.

31. Lev,i F., Randimbison, L., 2006,Cancer risk factor radiotherapy for breast cancer. Br J Cancer,Vol. 95,P. 390.

32. Li, J.,[etal] .,2010,  Preparationof biocompatible multi-walled carbon nanotubes as potential tracers forsentinel lymph node. Polymer International, Vol.59, P.169-174.