فهرست:
فصل اول: مقدمه و مروری بر مطالعات مشابه. 1
1-1- انتروباکتریاسه. 2
1-2- کلبسیلا.. 2
1-3- تاریخچه. 2
1-4- بیماری زایی کلبسیلا.. 2
1-5- محل میکروب کلبسیلا.. 3
1-6- عفونت بیمارستانی(Nosocomial Infection) و K.pneumoniae. 5
1-7- تشخیص آزمایشگاهی کلبسیلا پنمونیه. 7
1-8- درمان و پیشگیری کلبسیلا پنمونیه. 8
1-9- طبقه بندی آنتی بیوتیکها 9
1-10- آنتی بیوتیکهای-β لاکتام. 9
1-11- پنی سیلینها 10
1-12- سفالوسپورینها و سفامایسینها 11
1-13- کارباپنمها 12
1-14- آنتی بیوتیکهای -β لاکتام دیگر. 13
1-14-1- آنتی بیوتیکهای -β لاکتام منوسیکلیک.... 13
1-14-1-1- مکانیسم عمل آنتی بیوتیکهای-β لاکتام. 14
1-14-2- مکانیسم عمل سفالوسپورینها 14
1-14-3- مکانیسم عمل کارباپنمها 15
1-14-4- مکانیسم عمل –β لاکتامهای منوسیکلیک.... 16
1-14-4-1- مکانیسم مقاومت نسبت به آنتی بیوتیکهای–β لاکتام. 16
1-14-4-2- مکانیسم مقاومت نسبت به سفالوسپورینها 17
1-14-4-3- مکانیسم مقاومت نسبت به آنتی بیوتیکهای–βلاکتام منوسیکلیک.... 17
1-14-4-4- مکانیسم مقاومت نسبت به کارباپنمها 18
1-14-5- مهار کنندگان –βلاکتاماز 19
1-14-6- مکانیسم عمل مهار کنندههای–βلاکتاماز 19
1-14-7- بتالاکتامازهای وسیع الطیف(ESBLs) 20
1-14-7- تاریخچه مختصر بتالاکتامازها 20
1-14-8- انواع بتالاکتامازها 21
1-15- روش تشخیص.... 25
مروری بر مطالعات گذشته. 25
فصل دوم: مواد و روشها 28
2-1- بیان مسئله. 29
2-2- اهداف... 32
2-2-1- اهداف اصلی طرح.. 32
2-2-2- اهداف ویژه طرح.. 32
2-3- سؤالات و فرضیات... 33
2-4- نوع و روش مطالعه. 33
2-5- روش کار 34
2-5-1- محیط مورد استفاده جهت کشت باکتری.. 34
2-5-2- محیط کشتهای مورد استفاده جهت تعیین هویت باکتری.. 34
2-5-3- محیط کشت TSI(Triple Sugar iron agar) 37
2-5-4- محیط اوره(Urea agar) 38
2-5-5- محیط کشت مورد استفاده جهت تعیین ESBLs و سنجش حساسیت باکتریها نسبت به آنتی بیوتیکها: 38
2-6- روش اجرای کار 39
2-6-1- جمع آوری نمونهها 39
2-6-2- سنجش حساسیت باکتری نسبت به آنتی بیوتیکها 39
2-7- آنالیز آماری.. 40
2-8- محدودیت و مشکلات اجرایی طرح.. 41
2-9- متغیرها 41
فصل سوم: یافتهها 42
3-1- نتایج.. 43
فصل چهارم: بحث، نتیجه گیری و پیشنهادات... 66
4-1- بحث... 67
4-2- نتیجه گیری.. 73
4-3- پیشنهادات... 73
Abstract.. 74
فهرست مراجع.. 75
ضمیمه: پرسشنامه. 83
منبع:
مورایی، روزنتال.فالر میکروب شناسی پزشکی.مترجمین گیتا اسلامی، فاطمه فلاح.ویرایش پنجم، 1386:ص 402-385.
Brooks GF,Carrol KC,Butel JS,Morse SA,Mietzner AT,Gawetz.Melnik &Adelberg's Medical Microbiology. 26th edition.Mc Grow Hill companies.2013: pp229-41.
Umeh O, and Leonard B. B. Klebsiella Infection, http:// medicine. medscape. com/ article/ 219907- overview.2009.
Queenan AM, Bush K . Carbapenemases: the versatile betalactamases. Clin Microbiol Rev. 2007; 20 (3): pp 440-458.
Liberati A, D Amico R, Pifferi S, Torri V, Brazzi L. Antibiotic prophylaxis to reduce respiratory tract in fections and mortality in adults receiving intensive care (Cochrane review]. The Cochrane Library , Issue 1. Chichester: Wiely. 2004.
Kaoutar B, Joly C, Heriteau F, Robert J, Denis M. nosocomial infection and hospital mortality: a multicenter epidemiological study . Journal of Hospital Infection . 2004;58: pp 268-275.
Berthe M, Edmond M.B, Bearman G.M.l. Practces and an assessment of health care worker s perceptions of compliance with infection control knowledge of nosocomial infections. Am J. Infect. Control, 2005; 33: pp 55-7.
Van Saene HKF, Damjanovic V, Murray AE, Dela Cal MA. How to classify infections in intensive care units-the carrier state, a criterion whose time has come. J Host Infect. 1996; 33: pp 1-12.
O'Leary, WM. Partical handbook of microbiology. CRC press, Boca Raton, Florida. 1989 ; 55-66.
Baran Jr.J, Muckatira B, Khatib R. Candidemia before and during the floconazole era: prevalence , type of species and approach to treatment in a tertiary care community hospital, Scand. J. Infect. Dis. 2001; 33(2): 137-139.
ملک زاده فریدون.میکروب شناسی .فصل هشتم: باسیلهای روده ای، کلبسیلا، انتروباکتر، سراشیا، پروویدنسیا ، مورگانلا، تهران : انتشارات و چاپ دانشگاه تهران چاپ سوم؛ 1381:ص 288-287.
Sinha M., Srinivasa H. Mechanisms of resistance in Meropenem resistant Acinetobacter isolated from clinical samples. Ind. Jour. Med. Microbiol. 2007; 25(2): pp 121-125.
Yan JJ, Hsueh PR, Ko WC, Luh KT, Tsai SH, Wu HM, et al. Metallo-beta-lactamases in clinical Pseudomonas isolates in Taiwan and identification of VIM-3, a novel variant of the VIM-2 enzyme. Antimicrob Agents Chemother. 2001; 45(8): pp 2224-8.
Jalalpoor Sh, Kasra Kermanshahi R, Nouhi AS, Zarkesh Isfahani H. Comparing the frequency of β-lactamase enzyme in isolated nosocomial infectious bacteria. JRMS. 2009; 8(3): pp 203-14.
O'Leary, WM. Partical handbook of microbiology. CRC press, Boca Raton, Florida. 1989 ; 55-66.
مورایی و رزونتال و فالر. میکروب شناسی پزشکی ترجمه گیتا اسلامی . انتشارات آییژ.1387:ص 387-385.
مورایی و رزونتال و فالر. میکروب شناسی پزشکی ترجمه گیتا اسلامی . انتشارات آییژ.1387:ص 252-250.
Joseph D.C. Moellering R.C. Antibacterial agents. In: Murray P.R, Baron E.J, Pfaller M.A, Tenover F.C, Yolken R.h. Manual of clinical microbiology . 6th ed. 1995:pp 1281-1287. Washington, D.C. ASM press.
Mendiratta DK, Deotale V, Narang P. Metallo beta lactamase producing Pseudomonas aeruginosa in a rural area. Indian J Med Res. 2005;121: pp 701-3.
DUGAL S, FERNANDES A. CARBAPENEM HYDROLYSING METALLOßLACTAMASES. International Journal of Current Pharmaceutical Research. Vol 3, Issue 3. 2011.
Lee, K., Y. S. Lim, D. Yong, J. H. Yum, and Y. Chong. Evaluation of the Hodge test and the imipenem-EDTA doubledisk synergy test for differentiating metallo-beta-lactamaseproducing isolates of Pseudomonas spp. and Acinetobacter. spp. J. Clin. Microbiol. 2003; 41: pp 4623–4629.
Surveillance initiative,. Postgrad Med . 2001–2005; 120(3 Suppl 1): 8-15.
Medeiros AA. Evolution and dissemination of beta-lactamases accelerated by generations of beta-lactam antibiotics. Clin. Infect. Dis. 1997; 24: pp 19-45.
G.R.Zhao., L.F.Chang, 2007. Carbapenem beta-lactam antibiotics in chemical synthesis and structure-activity relationship study. (via www.eng.138.com)
Shibata N, Doi Y, Yamane K, Yagi T, Kurokawa H, Shibayama K, et al. PCR typing of genetic determinants for metallo-beta-lactamases and integrases carried by gram-negative bacteria isolated in Japan, with focus on the class 3 integron. J Clin Microbiol . 2003;41(12): pp 5407-13.
Struelens M.J., Monnet D.L., Magiorakos A.P., F.Santos O’Connor, Giesecke J. New Delhi metallo beta lactamase-1-producing Enterobacteriaceae: emergence and response in Europe. 2010.
Criag W.A. Antimicrobial drugs, penicillins. In: Sherwod L. G,Bartlet J.G. Blachlow N.R. Infectious diseases. 3rd ed. 2004: Pp 180 and 208. Baltimore, Williams & Wilkins.
Mahon R, Donald C, Manuselis G. .Diagnostic Microbiology. Saunders. 2007:pp 503-514.
Tahiry S., Mananteria A., Ratsinia E., Rakotonirina H.C., Randrianirina F., Ramparany L., Carod J.F., Richard V., and Talarmin A.Dissemination of Multi-drug Resistant Acinetobacter baumanii in various hospitals of Antananarivo Madagascar. Ann. Clin. Microbiol. Antimicrobe. 2010; 9:17.
Mosavi R, Mahbod A, Mohamadi M, Hamidi fard M. PAS (Practical Approach Series).Tehran: Mir 2007:496.
Walsh, T. R., A. Bolmstrom, A. Qwarnstrom, and A. Gales. Evaluation of a new E test for detecting metallo‐betalactamases in routine clinical testing. J. Clin. Microbiol. 2002; 40: pp 2755–2759.
jarlier A,Consensus guidelines for management of infectious by ESBL-producing bacteria.2001.Availaible in google.11.21.2005.
Bush k,Jacoby G.A & A.A Medeiros A.Functional classification scheme for beta-lactamase and its correlation with molecular structure.Antimicrob Agents chemother.1995;39(6):pp 1211-1233.
Mansouri M,Abbasi S.Prevalence of multiple drug resistant clinical isolates of Extended spectrum beta-lactamase producing Enterobacteriaceae in southeast iran.IJMS.2010;35(2):pp 101-108.
Liver D.M.Beta-lactamases in laboratory and clinical resistance.Clin Microbial.1995;Rev89(4].pp 557-584.
Bonomo R.A & Rice L.S.Inhibitor resistance class A beta-lactamases.frontiers in bioscience.1999;4:pp 34-41.
Murray PR,Rosenthal KS,tobayashi GS,Pfaller MA.Medical Microbiology.4th edition.Mosby Inc.2009:pp 186.
Bradford PA.Extended spectrum beta-lactames in the 12th century.characterization,epidemiology and detection of this important resistance threat.clinical microbiology reviews.2001;14(4):pp 933-951.
Hosoglu s,Gundes S,Kolayli F,et al.Extended spectrum beta-lactamases in ceftazidime.resistance E.coli and klebsiella pneumonia isolates in Turkish hospitals.Indian J Med microbial.2007;25:pp 346-350.
Todar K.Todar's online text online text book of bacteriology.Available at:http://www.textbook of bacteriology.net accessed 2011 dec; 14.
Shafaq AH, Syed A J, Mustafa K.Occurrence of multidrug resistant and ESBLproducing E.coli causing urinary tract infections.Journal of Basic and Applied Sciences. 2011;7( 1): 39-43.
Bali EB, Açık L, Sultan N. Phenotypic and molecular characterization of SHV, TEM, CTX-M and extendedspectrum BETA-lactamase produced by Escherichia coli, Acinobacterbaumanniiand Klebsiella isolates in a Turkish hospital. African Journal of Microbiology Research. 2010; 4(8):650-654.
Chong Y, Ito Y,Kamimura T.Genetic evolution and clinical impact in extended-spectrum b-lactamaseproducing Escherichia coli and Klebsiella pneumonia. Infect Genet E.2011;10 ( 16):11-13.
Emery CL,Weymouth LA.Detection and clinical significance of extended-spectrum β-lactamases in a tertiary-care medical center. J ClinMicrobiol. 1997;35(8): 2061–7.
Vosha G,Nidhisigl A,Chander J.Detection of ESBLs using third and fourth generation cephalosporins in double disk syenergy test.Indian J Med Res 126.2007:pp 486-487.
مبینهایده ، نهایی محمد رضا ، مظفری نور امیر ، مودب رضا ، مونسی شفیقه ، صفائیان فیروزه ، انگوتی گلی ، دهقان لیلا . آنزیم بتالاکتاماز طیف گسترده (ESBL) گروه CTX- M درسویههای بالینی کلبسیلا پنومونیه جدا شده از بخش مراقبتهای ویژه در بیمارستانهای آموزشی شهر تبریز, فصلنامه بیماریهای عفونی و گرمسیری وابسته به انجمن متخصصین بیماریهای عفونی و گرمسیری . پاییز1386 ؛سال دوازدهم )شماره38:( صفحات 21 تا 25.
شاه چراغی فرشته ، معزیهاله . Extended-Spectrum β-lactamase (ESBLs) درسویههای کلبسیلا پنومونیه جداشده از نمونههای کلینیکی بیمارستانهای تهران. فصلنامه بیماریهای عفونی و گرمسیری وابسته به انجمن متخصصین بیماریهای عفونی و گرمسیری. زمستان1386 ؛سال دوازدهم(شماره 39:(صفحات57 تا 60.
Herwana E, Laurentia Y, Julius P, Surjawidjaja E , Lesmana M. Prevalence of extended spectrum beta-lactamase in Klebsiella pneumonia.Univ Med 2008; Vol.27 (No.3): pp 98-105.
Nasehi Leila, Shahcheraghi Fereshteh, Sadat Nikbin Vajihe, Nematzadeh Shoeib. PER, CTX-M, TEM and SHV Beta-lactamases in Clinical Isolates of Klebsiella pneumoniae Isolated from Tehran, Iran. Iranian Journal of Basic Medical Sciences. Summer 2010; Vol. 13 (No. 3): pp 111-118.
RamazanzadehRashid. Prevalence and characterization of extended-spectrum beta-lactamase production in clinical isolates of Klebsiella spp. African Journal of Microbiology Research. 4 July 2010; Vol. 4 (13): pp 1359-1362.
Shah R.K., Singh Y.I, Sanjana R.K, Chaudhary Navin, Saldanha Dominic. Study of Extended spectrum beta-lactamases (ESBLs) producing Klebsiella species in various clinical specimens, A preliminary report. Journal of College of Medical Sciences.Nepal 2010;Vol-6(No-3): pp 19-23.
Al-Charrakh Alaah, Yousif Samira Y, Al-Janabi Hussein S. Occurrence and detection of extended spectrum beta-lactamases (ESBLs) in Klebsiella isolates in Hilla, Iraq. African Journal of Biotechnology. 24 January 2011; Vol. 10 (4): pp 657-665.
Dangre Mudey Gargi, Tankhiwale Neelima S, Fule R. P. Multidrug Resistance and Extended Spectrum Beta Lactamase Production in Klebsiella Species Isolated From Cases of Neonatal Septicaemia. J Life Sci. 2012; 4(1): pp 59-62.
Ghafourian Sobhan, Sekawi Zamberi,Vasanthakumari Neela , Khosravi Afra , Rahbar Mohammad, Sadeghifard Nourkhoda.Incidence of extended-spectrum beta-lactamase-producing Klebsiella pneumoniae in patients with urinary tract infection. Sao Paulo Med. J. São Paulo 2012; vol.130 (no.1).
Jalalpour Shila. Prevalence of Klebsiella pneumoniae ESBLs Producer Strains in Hospitalized and Community Acquired Urinary Tract Infections. Zahedan J Res Med Sci (ZJRMS]. 2012; pp 14(8): 87-89.
ملک زاده فریدون.میکروب شناسی .فصل هشتم: باسیلهای روده ای، کلبسیلا، انتروباکتر، سراشیا، پروویدنسیا ، مورگانلا، تهران : انتشارات و چاپ دانشگاه تهران چاپ سوم؛ 1381:ص 288-287.
Jalalpoor Sh, Kasra Kermanshahi R, Nouhi AS, Zarkesh Isfahani H. Comparing the frequency of β-lactamase enzyme in isolated nosocomial infectious bacteria. JRMS. 2009; 8(3): pp 203-14.
Al-Jasser AM. Extended-Spectrum Beta-Lactamases (ESBLs): A Global problem. Kuwait Med J. 2006 Sep; 38 (3): pp 171-185.
Ambler RP. The structure of beta-lactamases. Philos Trans R Soc Lond B Biol Sci. 1980;289(1036):pp 321-31.
Medeiros A, Mayer K, Opal SM. Plasmid beta-lactamases Antimicrobiol Newsl.1988;5:61-5.
Agrawal P, Ghosh AN, Kumar S, Basu B, Kapila K. Prevalence of extendedspectrum beta-lactamase among Escherichia coli and Klebsiella pneumonia in isolates in a tertiary care hospital. Indian J Path Microbiol. 2008; 51(1): pp 137-142.
Paterson DL, Bonomo R. Extendedspectrum beta-lactamases: a clinical update. Clin Microbiol Rev. 2005; 18(4): pp 657-686.
Livermore DM. β-lactamases in laboratory and clinical resistance. Clin Microbiol Rev; 1995. 8: pp 557-584.
Mendelson GV, Hait J, Ben-Israel D, Gronich E, Granot R. Prevalence and risk factors of extended-spectrum betalactamase- producing Escherichia coli and Klebsiella pneumonia in an Israeli long-term care facility. Eur J Clin Microbiol Infect Dis. 2005; 24: pp 17-22.
Agraval P, Ghush A, Agrawal P, Ghosh AN, Kumar S, Basu B, et al. Prevalence of extended-spectrum beta-lactamase among Escherichia coli and Klebsiella pneumonia in Isolates in a tertiary care hospital. Indian J Path Microbiol. 2008; 51(1): pp 137-142.
Bush K. Is it important to identify extended spectrum beta-lactamase producing isolates? Eur J Clin Microb Infect Dis. 1996; 15: pp361-364.
Shah AA, Hasan F, Ahmed S, Hameed A. Characteristics epidemiology and clinical importance of emerging strains of Gram negative bacilli producing extended-spectrum beta-lactamases. Res Microbiol. 2004;155(6):pp 409-421.
Matthew M. Plasmid-mediated beta-lactamases of Gram-negative bacteria: properties and distribution. J Antimicrob Chemother.1979; 5:349-58.
Bush K. Classification of b-lactamase. Antimicrob Agents Chemother. 1989;33(3):pp 264–270.
Renate I, Gniadkowski M. ceftazidime resistance Enterobacteriaceae Isolates from three polish Hospitals : Indentification of Three novel TEM and SHV-5 type Extended –Spectrum β-lactamase :journalAntimicrobial Agent and chemotherapy. 1998;(42):pp 514-520.
Samaha-Kfoury JN, Araj GF. Recent development in β-lactamase and extended spectrum β-lactamases. BMJ. 2003 Nov; 327: pp1209-1213.
Rupp M, Fey P. Extended spectrum beta-lactamase (ESBL)-producing Enterobacteriaceae: considerations for diagnosis, prevention and drug treatment. Drugs. 2003; 63(4): pp 353-365.
Al-Zahrani AJ, Akhtar N. Susceptibility patterns of extended spectrum β-lactamases (ESBL) producing Escherichia coli and Klebsiella pneumoniae isolated in a teaching hospital. Pakistan J. Med Res. 2005 Apr; 44(2): pp 64-67.
Palasubramaniam S, Muniandy S, Navaratnam P. Rapid detection of ESBL-producing Klebsiella pneumoniae in blood culture by fluorescent in-situ hybridization. J Microbiol Methods.2008 Jan; 72: pp 107-109.
Sinha M, Srinivasa H, Macaden R. Antibiotic resistance profile & extended spectrum betalactamase (ESBL) production in Acinetobacter Species. Indian J Med Res. 2007 Jul; 127: pp 63-67.
Sturenburg E, Mack D. Extended spectrum beta-lactamases: implication for the clinical.
Padmini S, Raju B. Evaluation of CIVA agar for rapid detection of extended spectrum β-lactamases (ESBL) among isolates of Enterobacteriaceae. Indian J Med Res. 2008 Feb;127: pp 195-197.
Winn W,Allen S,Jandana W.Konemas color atlas and textbook of diagnostic microbiology.6th edition.Lippincott Williams and Wilkins.2006;appendix 2.
Performance Standards for Antimicrobial Susceptibility Testing; Twenty-First Informational Supplement.2011;M100-S21,Vol.31 No.1.
Jarlier V, Nicolas MH, Fournier G. philippon A. Extended broad- Spectrum beta-lactamases coconfering transferable resistance to newer beta- lactam agent in enterobacteriaceae, hospital prevalence anand susceptibility patterns. Rev Infect Dis. 1998; 10(4): pp 867-878.
Ghafourian S,Bin Sekawi Z,Sadeghifard N,Mohebi R,Kumari Neela V,Maleki A,Hematian A,Rhabar M,Raftari M,Ranjbar R.The Prevalence of ESBLs Producing Klebsiella pneumonia isolates in Some Major Hospitals.Iran.open Microbiol J.2011;5:pp 91-5.
Kreten V,Ulusoy S,Zarakolu P,Mete B.Turkish MYSTIC Study group-Antibiotic resistance over a 4 year period(2000-2003) in Turkey:results of the MYSTIC program.Diagn Microbiol Infect Dis.2007;59(4):pp 453-7.
مسجدیان جزی فرامرز، والهی فرحناز، طالبی اردشیر، رستگار لاری عبد العزیز.بررسی مولکولی مقاومت به آنتی بیوتیکهای وسیع الطیف در اشرشیاکلی و کلبسیلا پنمونیه.مجله میکروب شناسی پزشکی ایران، شماره 2، سال 1. 1386:ص27.
Ozgunes I,Erben N,Kiremitici A,Kartal ED,Durmaz G,Colak H,U sluer G,Colak E.The prevalence of extenede spectrum beta lactamase producing Escherchia coli and klebsiella pneumonia in clinical isolates and risk factors.saudi Med J.2006;27(5):pp 608-12.
Romero ED,Padilla TP,Hernandez AH,Grande RP,Vazquez MF,Garcia IG,Garcia-Rodriguez JA,Munoz Bellido JL.prevalence of clinical isolates of Escherchia coli and klebsiella spp.producing multiple extended –spectrum beta lactamases. Diagn Microbiol Infect Dis.2007;59(4):pp 433-7.
Khoury RH,Ryzhkova I,Salmon B,et al.The prevalence of extended-spectrum beta lactamase(ESBLs)producing E.coli and klebsiella pneumonia in urinary tract infection in long term care facilities.The American Geriatrics society annual scientific Meeting.2008.
نخعی مقدم محبوبه، نادری فر سحر و همکاران.الگوی حساسیت آنتی بیوتیکی و شناسایی بتالاکتامازهای طیف وسیع تیپ CTX-M در جدایههای ادراری کلبسیلا پنمونیه شهر مشهد.دوماهنامه علمی-پژوهشی دانشور پزشکی دانشگاه شاهد، سال نوزدهم، شماره 96.دی 90.
آرچین طلیعه، افضلیان عصمت، کارگر محمد، قاسمی یونس.تشخیص مولکولی ژنهای بتالاکتامازی CTX-M,TEM وSHV و بررسی الگوی مقاومت آنتی بیوتیکی در ایزولههای کلبسیلا پنمونیه جدا شده از نمونههای بالینی در بخش مراقبتهای ویژه بیمارستان نمازی شیراز.ارمغان دانش.مجله علمی پژوهشی دانشگاه علوم پزشکی یاسوج، دوره 18، شماره 10.بهمن 1392.
Mirsalehian A, Akbari Nakhjavani F,peymani A,Jabal ameli F. Prevalence of extended-spectrum beta lactamases producing En terobacteriaceae in Intensive care unites(ICU]. Tehran Univ 2007:65(1):pp 33-38.
Luvsansharav U,Hirati I,Niki M,et al.Analysis of risk factors for a high prevalence of extended- spectrum beta lactamases producing Enterobacteriaceae in asymptomatic individuals in rural Thailand.J Med Microbial.2011;60(5):pp 619-624.
Eksi F,Ozer G,Balci I.Investigation of the frequency of extended- spectrum beta lactamases and antibiotic resistance in clinical isolates of Echerchia coli and klebsiella spp.Microbiol Bul .2007;41(3):pp 447-52.